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厭氧培養箱的使用注意事項有哪些

更新時(shí)間:2025-05-19      點(diǎn)擊次數:135

厭氧培養箱是用于培養厭氧微生物的關(guān)鍵設備,使用時(shí)需嚴格遵守操作規范以確保實(shí)驗結果的準確性和人員安全。以下是主要注意事項:

一、操作前準備
1. 檢查氣源
  確認氮氣、氫氣、二氧化碳氣瓶壓力充足(通常需≥2MPa),氣體純度≥99.99%,避免雜質(zhì)影響厭氧環(huán)境。
  檢查氣體管道連接是否密封,防止泄漏。
2. 預還原培養基
  培養基使用前需煮沸驅氧并迅速冷卻,或添加還原劑(如半胱氨酸、刃天青指示劑),確保無(wú)氧狀態(tài)。
3. 設備密封性檢查
  關(guān)閉艙門(mén)后,用肥皂水檢測接口和手套是否有漏氣(氣泡產(chǎn)生),確保密封性。


二、操作過(guò)程注意事項
1. 嚴格除氧程序
  先通入氮氣置換空氣(3 5次循環(huán)),再通入混合氣體(如N?:CO?:H?=85:10:5),最后通過(guò)鈀催化劑去除殘余氧氣。
  使用氧濃度檢測儀確認艙內O?濃度<1%(理想值<0.1%)。
2. 樣品傳遞規范
  使用專(zhuān)用傳遞艙:先抽真空再充氮氣(重復2 3次),避免氧氣進(jìn)入主艙。
  傳遞物品需表面消毒,減少污染風(fēng)險。
3. 溫度與濕度控制
  維持培養溫度(通常35 37℃),濕度建議60 80%,防止培養基干燥。
4. 安全操作
  禁止明火:氫氣為易r氣體,操作時(shí)關(guān)閉火源。
  戴手套避免直接接觸培養物,防止生物污染。

三、日常維護
1. 催化劑活化
  鈀催化劑(除氧劑)每2 3個(gè)月于160℃烘烤2小時(shí)再生,失效時(shí)需更換(顏色變深或除氧效率下降)。
2. 清潔與消毒
  每周用75%酒精或專(zhuān)用消毒劑擦拭艙體內壁、手套和傳遞艙。
  污染時(shí)立即停機,滅菌(如過(guò)氧化氫熏蒸)。
3. 定期檢查
  檢查壓力表、傳感器、電磁閥是否正常,氣體流量是否穩定。

四、常見(jiàn)問(wèn)題處理
  氧氣泄漏:立即關(guān)閉氣源,檢查密封圈或手套是否破損。
  培養污染:排查傳遞艙滅菌是否手套是否有裂縫。
  設備報警:記錄錯誤代碼,聯(lián)系廠(chǎng)家技術(shù)支持,勿自行拆解。


五、安全警示
  氫氣風(fēng)險:保持通風(fēng),安裝氫氣檢測報警器,避免濃度≥4%(爆炸下限)。
  生物安全:處理病原微生物時(shí)需符合實(shí)驗室生物安全等級要求(如BSL 2)。


正確使用和維護厭氧培養箱可延長(cháng)設備壽命并確保實(shí)驗可靠性。建議定期培訓操作人員,并保存完整的設備使用記錄。

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